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基礎信息Product information
產品名稱：
肺炎支原體核酸檢測試劑盒說明書
產品簡介：
肺炎支原體核酸檢測試劑盒說明書保存：如果樣本收集后不及時檢測，請按一次用量分裝，凍存于-20℃，避免反復凍融，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
產品型號：50T
廠商性質：經銷商
訪問量：405
更新時間：2021-06-11
產品特性Product characteristics
服務流程：
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
肺炎支原體核酸檢測試劑盒說明書 | 50T | HE60654-R |
實驗過程：
一、試劑準備
1. DNA模板
2．對應目的基因的特異引物（在PCR反應中，新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制，而不能從無到有，憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物?？梢允荄NA也可以是RNA，一般20多bp，需要根據你的模板鏈設計。因此，擴增不同的基因需要設計不同的引物）
3．10×PCR Buffer
4．2mM dNTPmix：含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5．Taq酶
二、操作步驟
1．在冰浴中，按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1（10pM） 2μl
引物2（10PM） 2μl
Taq酶（2U/μl） 1μl
DNA模板（50ng-1μg/μl） 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋，不加或添加石蠟油。
2．調整好反應程序。將上述混合液稍加離心，立即置PCR儀上，執行擴增。一般：在93℃預變性3-5min，進入循環擴增階段：93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s，循環30-35次，zui后在72℃ 保溫7min。
3．結束反應，PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4．PCR的電泳檢測：如在反應管中加有石蠟油，需用100μlLuFang進行抽提反應混合液，以除去石蠟油；否則，直接取5-10μl電泳檢測。
PCR實驗步驟：
①取凍存已裂解的細胞，室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang，蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后，15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相，中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA，混勻后15到30℃孵育10分鐘后，于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液，每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制)，清洗RNA沉淀?；靹蚝?，4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液，使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時，先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次，使其*溶解，獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后，讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值，測定RNA溶液 濃度和純度。
5-溴-4-氯-3-吲哚基-N-乙酰-beta-D-氨基半乳糖苷 X-Galactosamidide 129572-48-1 質量規格：分子生物學級 石蠟切片DNA高質純化試劑盒 進口/國產 規格：20次
巖藻黃質；褐藻素 Fucoxanthin 3351-86-8 質量規格：BR,UV>30% 石蠟切片DNA分離＋高質純化試劑盒 進口/國產 規格：100次
Brij 58 Brij 58 9004-95-9 質量規格：BR 石蠟切片組織線粒體DNA分離試劑盒 進口/國產 規格：50次
二硫代乙酰胺(>98%,BR) Dithiooxamide 79-40-3 質量規格：>98%,BR 口腔粘膜細胞基因組DNA純化試劑盒 進口/國產 規格：50次
脫氧核糖核酸酶 II DNase II, from Pocine Pancreas 9025-64-3 質量規格：分子生物學級 植物基因組DNA純化試劑盒（低多糖/酚） 進口/國產 規格：50次
高粘度纖維素 HEC, hydroxyethyl cellulose 9004-62-0 質量規格：38000~42000 mpa.s 植物基因組DNA純化試劑盒（高多糖/酚） 進口/國產 規格：50次
L-天冬氨酸鈉一水 L-Aspartic acid sodium salt, monohydrate 323194-76-9 質量規格：>99%，BR 土壤DNA分離試劑盒 進口/國產 規格：50次
鉛屑(>99%，5N) Lead granules 7439-92-1 質量規格：>99%，5N 土壤DNA高質純化試劑盒 進口/國產 規格：20次
粘蛋白 Mucin from bovine submaxillary glands 84195-52-8 質量規格：Type I-S; from bovine submaxillary glands 土壤DNA分離+高質純化試劑盒 進口/國產 規格：20/50次
N,N'-二琥珀酰亞胺基碳酸酯(>98%,EP) N,N'-Disuccinimidyl carbonate (DSC) 74124-79-1 質量規格：>98%,EP 土壤細菌DNA分離試劑盒 進口/國產 規格：50次
氟化鎳四水(>98%,BR) Nickel (II) fluoride tetrahydrate 10028-18-9 質量規格：>98%,BR 土壤細菌DNA分離+高質純化試劑盒 進口/國產 規格：20/50次
二氧化硅(>99.9%,BR) Silicon (IV) oxide 14808-60-7 質量規格：>99.9%,BR 冰凍切片DNA分離試劑盒 進口/國產 規格：50次
氟化鍶(>97%,BR) Strontium fluoride 7783-48-4 質量規格：>97%,BR 動物細胞基因組DNA分離試劑盒 進口/國產 規格：20/50次
丁香醛(>98%,BP) Syringaldehyde 134-96-3 質量規格：>98%,BP 動物組織基因組DNA分離試劑盒 進口/國產 規格：50次
肺炎支原體核酸檢測試劑盒說明書大鼠轉狀腺素蛋白（TTR）ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 α1-酸性糖蛋白(α1AGP)重組蛋白Recombinant Alpha-1-Acid Glycoprotein (a1AGP)
八聚體轉錄因子(OTF2A)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 α2-巨球蛋白(α2M)重組蛋白Recombinant Alpha-2-Macroglobulin (a2M)
抗呼吸道合胞病毒抗體(RSV IgM)ELISA試劑盒48T/96T試劑盒 α2-纖溶酶抑制因子(α2PI)重組蛋白Recombinant Alpha-2-Plasmin Inhibitor (a2PI)
細胞色素P450c21B/21-羥化酶(CYP21B)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 α-胞襯蛋白(SPTAN1)重組蛋白Recombinant Alpha-Fodrin (SPTAN1)
小鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 α-乳清蛋白(αLA)重組蛋白Recombinant Alpha-Lactalbumin (aLA)
小鼠新生狀腺素(NN-T4)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 α-血紅蛋白穩定蛋白(αHSP)重組蛋白Recombinant Alpha-Hemoglobin Stabilizing Protein (aHSP)
大鼠肽基肽酶Ⅳ(DPPⅣ)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 β2-微球蛋白(β2M)重組蛋白Recombinant Beta-2-Microglobulin (b2M)
猴子層連蛋白/板層素(LN)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 β-位淀粉樣前體蛋白裂解酶1(βACE1)重組蛋白Recombinant Beta-Site APP Cleaving Enzyme 1 (bACE1)
白血病抑制因子(LIF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 β細胞素(βTC)重組蛋白Recombinant Betacellulin (bTC)
溴脫氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 δ-促睡眠肽(δSIP)重組蛋白Recombinant Delta-Sleep Inducing Peptide (dSIP)
抗糖蛋白抗體(GP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 β-血小板球蛋白(βTG)重組蛋白Recombinant Beta-Thromboglobulin (bTG)
使用方法：
一、樣品采集：
1、食品樣品：樣品的采集與預培養按照樣品的采集與預培養按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品：用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL，注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管，立即混勻。
3、糞便樣品：取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品：取發病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照（以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例）
1. 注意：由于標準品濃度非常高，因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行，千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分）。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原，本產品不提供活體樣品做陽性對照，只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管，分別為 7，6，5，4，3，2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液（用帶芯槍頭，下同）。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照，充分震蕩 1 分鐘，得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭，在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得)，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭，在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中，充分震蕩 1 分鐘，得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
8.公司產品僅用于科研。
