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021-59989018
產品簡介:
產品型號:50T
廠商性質:經銷商
訪問量:492
更新時間:2021-06-11
服務流程:
接受訂單及樣品——RNA提取——RNA質量檢測——樣品cDNA合成——定量試驗——數據分析——結果交付——售后服務。
產品名稱 | 規格 | 貨號 |
人鼻病毒核酸檢測試劑盒說明書 | 50T | HE60647-R |
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
鹽酸頭孢唑蘭 Cefozopran hydrochloride 113981-44-5 質量規格:>97%,BR 毛發汞元素比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格:20次
阿嗪米特(標準品) Azintamide 1830-32-6 質量規格:含量測定 通用型砷元素比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格:20次
普魯卡因(標準品) Chloroprocaine hydrochloride 3858-89-7 質量規格:含量測定 水質砷元素比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格:20次
鹽酸乙哌立松(標準品) Eperisone hydrochloride 56839-43-1 質量規格:含量測定 土壤砷元素比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格:20次
孕三烯酮(標準品) Gestrinone 16320-04-0 質量規格:含量測定 魚類組織砷元素比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格:20次
西尼地平(標準品) Cilnidipine 132203-70-4 質量規格:HPLC>97%,標準品 細胞砷元素比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格:20次
西尼地平 Cilnidipine 132203-70-4 質量規格:>97%,BR,可用于細胞培養 組織砷元素比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格:20次
托品醇(鹽酸托烷司瓊雜質)(標準品) Tropine 120-29-6 質量規格:供檢查用 血液砷元素比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格:20次
輔酶Q9 CoenzymeQ9 303-97-9 質量規格:>99% 體液砷元素比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格:20次
輔酶Q9(標準品) CoenzymeQ9 303-97-9 質量規格:>99%,標準品 毛發砷元素比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格:20次
利可君(標準品) Leucoson 1950-36-3 質量規格:含量測定 砷元素檢測樣品處理試劑盒 進口/國產 規格:20次
拉米夫定(標準品) Lamivudine 134678-17-4 質量規格:含量測定 通用型硫酸酶(rhodanase)活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格:20次
鹽酸班布特羅(標準品) Bambuterol Hydrochloride 81732-46-9 質量規格:含量測定 細胞硫酸酶(rhodanase)活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格:20次
N-乙酰氨基葡萄糖(標準品) N-Acetyl-D-Glucosamine 7512-17-6 質量規格:>98%,標準品 組織硫酸酶(rhodanase)活性比色法定量檢測試劑盒 進口/國產 規格:20次
人鼻病毒核酸檢測試劑盒說明書96T/48T試劑盒組裝/原裝 C-型凝集素域家族2成員C(CLEC2C)重組蛋白Recombinant C-Type Lectin Domain Family 2, Member C (CLEC2C)
大鼠組織蛋白酶K(cath-K)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 Dermokine蛋白(DMKN)重組蛋白Recombinant Dermokine (DMKN)
白介素10(IL-10)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 Dickkopf相關蛋白2(DKK2)重組蛋白Recombinant Dickkopf Related Protein 2 (DKK2)
抗脊髓灰質炎病毒(PV-Ab)ELISA試劑盒96T/48T試劑盒 Discs大同源物關聯蛋白5(DLGAP5)重組蛋白Recombinant Discs, Large Homolog Associated Protein 5 (DLGAP5)
細胞周期素D2(Cyclin-D2)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 EGF樣域蛋白6(EGFL6)重組蛋白Recombinant EGF Like Domain Protein, Multiple 6 (EGFL6)
小鼠Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 EGF樣域蛋白7(EGFL7)重組蛋白Recombinant EGF Like Domain Protein, Multiple 7 (EGFL7)
小鼠溴脫氧核苷尿嘧啶(BrdU)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 Enah/Vasp樣蛋白(EVL)重組蛋白Recombinant Enah/Vasp Like Protein (EVL)
大鼠附睪蛋白4(HE-4)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 FK506結合蛋白樣蛋白(FKBPL)重組蛋白Recombinant FK506 Binding Protein Like Protein (FKBPL)
猴子巨噬細胞移動抑制因子(MIF)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 FMS樣酪氨酸激酶3(Flt3)重組蛋白Recombinant FMS Like Tyrosine Kinase 3 (Flt3)
可溶性細胞間粘附分子1(sICAM-1)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 GATA結合蛋白4(GATA4)重組蛋白Recombinant GATA Binding Protein 4 (GATA4)
半糖6硫酸酯酶(Gal-6S)ELISA 試劑盒96T/48T試劑盒 GATA結合蛋白3(GATA3)重組蛋白Recombinant GATA Binding Protein 3 (GATA3)
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預培養按照樣品的采集與預培養按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
8.公司產品僅用于科研。